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HPLC液相色谱柱的尺寸选择

点击次数:573 发布时间:2020-01-14
   HPLC液相色谱柱采用特殊的键合工艺,双封尾,键合密度大,碳含量高,疏水性较高(极性低),适用于各类非极性化合物分析,在酸或碱性流动相下都有很好的分离效果。
 
  HPLC液相色谱柱的尺寸选择:
  较长的色谱柱组分保留较强,运行时间较长,柱效更高,分离度效果更好。在实际工作中应综合衡量运行时间和柱效,选择长度适宜的色谱柱。例如含量测定、溶出检测对于分离的要求较低,可选用较短的色谱柱,减少运行时间;有关物质一般选择较长的色谱柱,提高分离效果。
 
  内径小的色谱柱灵敏度较高,峰型更窄,但是载样量较小。如果载样量满足要求,需要更高更尖锐的峰提高灵敏度,可以选择更小内径。但是如果进样量超过了柱载样量,色谱峰将极大变宽。所以应在灵敏度和载样量之间综合衡量。
 
  粒径小的色谱柱分离度较好,色谱柱压力更大。如果5μm粒径的色谱柱分离度稍有不足,则同型号3μm色谱柱的分离度一般会提供令人满意的选择性。
 
  如果选择较小尺寸的色谱柱,应衡量柱外死体积对柱效的影响,柱外死体积包括连接管线、进样体积、色谱柱接头与色谱柱连接处的空隙等。所以一般超高效液相使用的色谱柱不适用于常规液相仪。小规格色谱柱使用同一品牌的仪器,减少连接处空隙引入的死体积。

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