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HPLC液相色谱柱在使用过程中易出现的问题和解决办法
点击次数：603 发布时间：2020-04-27
HPLC液相色谱柱是一种高效的分析手段，是色谱分析系统的“心脏”，由于被分析样品种类繁多，加之样品基质复杂，极易被强保留物质污染。这些强保留物质通常难以洗脱，多次上样后，聚集在柱头端，堵塞筛板，甚至可能与填料发生相互作用导致填料变性，这会导致柱效下降，分离度降低和峰型异常等现象。
HPLC液相色谱柱在使用过程中易出现的问题和解决办法
在使用中常见的问题就是柱压升高，如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加，属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高（系统管路堵塞及压力传感器故障除外），可能的原因有如下几点：
(1)柱头的过滤筛板堵塞或污染；
(2)柱头的填料被样品污染；
(3)柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂，形成结晶析出；
(4)流动相pH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。
解决办法如下：
(1)如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染，可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力，或者卸下色谱柱头，将其放在10%的稀硝酸内超声清洗10分钟，后再用纯水超声10分钟，重新装入色谱柱。
(2)如确定色谱柱头的填料被污染，将柱头螺丝卸下，挖出柱内前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔细修复后，重新安装上柱头螺丝。
(3)如确定定是盐结晶，用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解，再换高浓度甲醇。
(4)如果因pH值使用不当，很难恢复。
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