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HPLC液相色谱柱在使用过程中易出现的问题和解决办法

点击次数:268 发布时间:2020-04-27
   HPLC液相色谱柱是一种高效的分析手段,是色谱分析系统的“心脏”,由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,极易被强保留物质污染。这些强保留物质通常难以洗脱,多次上样后,聚集在柱头端,堵塞筛板,甚至可能与填料发生相互作用导致填料变性,这会导致柱效下降,分离度降低和峰型异常等现象。
 
  HPLC液相色谱柱在使用过程中易出现的问题和解决办法
  在使用中常见的问题就是柱压升高,如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加,属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高(系统管路堵塞及压力传感器故障除外),可能的原因有如下几点:
  (1)柱头的过滤筛板堵塞或污染;
 
  (2)柱头的填料被样品污染;
 
  (3)柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂,形成结晶析出;
 
  (4)流动相pH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。
 
  解决办法如下:
  (1)如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染,可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力,或者卸下色谱柱头,将其放在10%的稀硝酸内超声清洗10分钟,后再用纯水超声10分钟,重新装入色谱柱。
 
  (2)如确定色谱柱头的填料被污染,将柱头螺丝卸下,挖出柱内前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔细修复后,重新安装上柱头螺丝。
 
  (3)如确定定是盐结晶,用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解,再换高浓度甲醇。
 
  (4)如果因pH值使用不当,很难恢复。

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