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HPLC液相色谱柱要如何反冲

点击次数:94 发布时间:2020-07-15
   HPLC液相色谱柱的构造:
  色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70Kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛光相同还有使用熔融硅或玻璃衬里的,用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板,是烧结不锈钢或钛合金。取决于填料粒度,目的是防止填料漏出,柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定,目的是为了避免管壁效应。
 
  HPLC液相色谱柱要如何反冲:
  液相色谱柱反冲时遵循的原则是用比流动相洗脱能力更强的溶剂冲洗。
 
  反相色谱柱可以选择极性较小的溶剂反向冲洗,推荐如下冲洗方法:
 
  水→甲醇→乙腈→异丙醇→二氯甲烷→异丙醇→乙腈
 
  正相色谱柱可以选择极性较大的溶剂反向冲洗,冲洗方法如下:
 
  正己烷→二氯甲烷→乙酸乙酯→异丙醇→乙腈→甲醇
 
  如果流动相中含有缓冲盐,在运行序列过程中出现柱压异常升高的现象,则发生了缓冲盐在色谱柱柱床上析出,推荐采用如下维护方法:
 
  •用甲醇/水反向冲洗色谱柱60个柱体积;
 
  •用甲醇/水反向冲洗色谱柱过夜。
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