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瑞典液相色谱柱的柱长及内径选择及维护工作

点击次数:191 发布时间:2021-05-23
   瑞典液相色谱柱的柱长及内径选择:
  长度的选择:柱越长,总柱效越高(n值越大),柱越长,分析时间也越长。实验室一半以上的工作都是采用此规格柱子,一般用来分离l0到50个组份的中等至复杂混合物;要求较高分辨率的应用,—般用来分离大于50个组份或包含有难分离物质的复杂样品程序升温分析。
 
  内径:柱效率与柱半径平方成反比,内径越小柱效越高,但内径越大,柱容量也增加,允许进样量就越多。当进样量超过柱容量时,则因柱内每块理论板内不能建立真正的平衡,将会导致色谱蜂畸变,柱分辨率降低,重现性不好。
 
  因此对于复杂样品需要精确分离,须使用小内径柱子。另一方面若样品中存在具有很不相同浓度组份化合物,为了增加样品容量就须使用内径大的柱子,目前实验室使用常见的柱子内径一般是4.6mm。
 
  瑞典液相色谱柱的维护:
  a.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)。
 
  b.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围。
 
  c.避免流动相组成及极性的剧烈变化。
 
  d.流动相使用前必须经脱气和过滤处理。
 
  e.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存于甲醇或乙腈中。
 
  f.氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。

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